Il Cenacolo fu realizzato da Leonardo da Vinci tra il 1494 e il 1498 nel refettorio del convento adiacente alla chiesa domenicana di Santa Maria delle Grazie a Milano, su commissione di Ludovico il Moro, nell'ambito dei lavori promossi nel santuario per la celebrazione della casata Sforza.
Leonardo arricchisce quest'opera, nella sua apparente semplicità, di un complesso apparato semantico, sovrapponendo, strato dopo strato, significati e simboli celati in oggetti d'uso comune e che assumono, nel capolavoro, un peso concettuale elevatissimo, rendendo la sua Ultima Cena un prezioso manufatto, non solo artistico e dall'incommensurabile valore estetico e storico ma anche simbolico, alchemico e teologico.
Arricchiscono il documentario con i loro interessanti contributi il giornalista e scrittore Luca Frigerio, critico d'arte, curatore della sezione culturale dei media della Diocesi di Milano, e la storica dell'arte Sara Taglialagamba, direttore della Nuova Fondazione Rossana e Carlo Pedretti.