Специалист в области молекулярной биологии, профессор Сколковского института науки и технологий, профессор Ратгерского университета (США) Константин Северинов проводит на моем канале курс лекций по молекулярной биологии. Это продолжение лекции: Как клонируют ДНК - кошмар борцов с ГМО. На этот раз на основе полученных знаний пытаемся открыть производство инсулина и убедить в его состоятельности потенциального инвестора.
Домашка - • Post
00:00 Начало
00:26 Вступление. Оргвопросы
02:40 Как будет устроен Университет Северинова
05:18 План лекции
06:55 Явление рестрикции-модификации
09:04 Механизм рестрикции-модификации: способ защиты от чужеродной ДНК
12:48 Ферменты рестрикции-рестриктазы (эндонуклеазы рестрикции)
16:07 Плазмида кишечной палочки E. coli pBR322
18:51 Рестрикционный перевар плазмиды
20:11 Плазмида pBR322 подробнее
21:10 Рестрикционное картирование плазмиды
25:17 Как установить важность участка ДНК для функции плазмиды
33:08 Направленные делеции
42:08 Ферменты для молекулярного клонирования. Как их искать?
50:54 Можно ли плазмид уменьшить размер, удалив некодирующие участки? Это даст преимущество оставшимся в бактерии генам этой плазмиды?
52:24 Можно создать рестриктазы искусственной селекцией тех бактерий, которые будут выживать при взаимодействии с целевым вирусом?
53:01 Плазмиды могут реплицироваться в бактерии бесконечно или ограниченное количество раз?
53:43 Насколько рестриктазы похожи друг на друга?
54:41 Клонирование ДНК
58:12 Молекулярное клонирование
58:38 Секвенирование ДНК (Фред Сенгер)
1:01:34 Универсальные прайсы для секвенирования/векторы для клонирования/библиотеки клонов
1:04:05 Диабет и проблема свиного инсулина
1:04:51 Как "выделить" ген интереса из генома?
1:05:09 Генная инициатива в СССР
1:08:30 Создание геномной библиотеки
1:09:48 Рестрикционный перевар/электрофорез ДНК человека
1:11:26 Плавление и "отжиг" (гибридизации) ДНК
1:14:43 Центральная догма молекулярной биологии
1:15:14 Вырождение пробы для гибридизации ДНК
1:18:07 Гибридизации по Саузерну
1:21:03 Создание геномной библиотеки
1:22:34 Идентификация гена интереса с помощью гибридизации ДНК в колониях бактерий
1:25:45 Как математически определить минимально достаточную область?
1:30:05 Можно таким образом найти ген, кодирующий молекулы инсулина с более высоким сродством к рецепторам?
1:31:43 Экспрессивное клонирование
1:33:23 Основная разница в трансляции РНК у прокариот и эукариот
1:35:47 Основная разница в транскрипции РНК у прокариот и эукариот
1:38:58 Проверка сверхпродукции белка интереса
1:45:35 Молекулярное клонирование: рекомбинантные белки
1:51:17 Советские рекомбинантные белки
1:53:13 "Светящиеся" бактерии.
1:54:38 С чем связано, что у кого-то шапероны предотвращают формирование прионных структур, типа амилоидных или синуклеиновых структур, а у других нет?
1:55:53 Почему нельзя использовать бактерии-симбионты, живущие в кишечнике, для вырабатывания инсулина?
1:57:10 Почему до сих пор используют инсулин?
1:58:14 Советский инсулин "не взлетел" потому, что не было стадии очистки и технологии масштабирования?
2:01:11 Почему отечественные учёные не сделают обращение в компетентные органы с тем, чтобы разрешить вопрос налаживания качественного конкурентного производства?
2:02:05 Не проще вколоть человеку мРНК, чтобы он сам производил инсулин?
2:03:18 Рестриктаза могла порезать и ген интереса, но не тронуть участок, комплиментарный нашей пробе, и мы обнаружим это только на этапе электрофореза белка?
2:04:41 Заключение. Оргвопросы
2:09:20 Благодарности
Предыдущие лекции - • Константин Северинов. ...
стать патроном - / plushev
Поддержать канал биткоином - bc1qp8kagzf9q26jj69ncd0kmgxm9lu56y92lxygn5
Оформление - vlso.ru
Каналы соратников:
Майкл Наки - наш совместный стрим и грандиозные ролики - / @macknack
"Кек и Символ" Тани Фельгенгауэр - / @tfelg
#Северинов #Плющев #молекулярнаябиология