Приготовление питательных сред для микробиологии. Полный цикл, все этапы. Часть 2

Рет қаралды 10,968

Микробиология и инфекции. Канал Романа Овчинникова

4 жыл бұрын

Продолжение видео о приготовлении питательных сред. Подробная демонстрация всех этапов приготовления питательной среды в микробиологической лаборатории.
Первую часть видео смотрите здесь:
• Приготовление питатель...
Основные моменты второй части:
- стерилизация сред (автоклавирование)
- разливка сред по чашкам и пробиркам
- контроль качества питательных сред.
********
Друзья, если это видео было полезным, в чем-то помогло вам - поддержите наш канал!
money.yandex.ru/to/4100114280...
По этой ссылке вы можете легко сделать перевод на банковскую карту или кошелек Яндекс-Деньги, пожертвования пойдут на развитие канала. Спасибо за ваше участие!
***********
Интересуетесь микробиологией?
Читайте в соцсетсях "Блог микробиолога-практика Романа Овчинникова"!
Фейсбук: blogmicrobiologa
ВКонтакте: blogmicrobiologa
Наш веб-сайт по лабораторной диагностике инфекций:
"Бакпосев.Ру" - bakposev.ru
#микробиологияиинфекции #микробиология #microbiology

Пікірлер: 114

@NikolaNikola69 2 ай бұрын

👍👍Спасибо Вам большое за информацию.

@roman.s.ovchinnikov 2 ай бұрын

Всегда пожалуйста)

@user-hk4jq2gh6m Жыл бұрын

Очень полезный ролик. С нужными подробностями. Спасибо.

@roman.s.ovchinnikov 3 ай бұрын

Спасибо)

@fandorenko 3 жыл бұрын

Отличное видео. Спасибо вам. До простой мысли ставить чашки Петри с застывшим агаром в термостат для проверки стерильности я не додумался. Сразу высевал на свежезастывший агар и потом гадал откуда в чашке развелось столько зверья, то ли посевной материал грязный, то ли агар был недостаточно простерелизован, то ли в момент высева налетело незваных гостей.

@roman.s.ovchinnikov 3 жыл бұрын

Да, контроль стерильности сред, и контроль чистоты помещений - это основы основ микробиологии)

@user-sv2dq3tb1p 4 жыл бұрын

Роман, подскажите, как часто и нужно ли проверять качество пит сред качественным методом с применением тест-штаммов? Используем в основном сухие пит среды отечественного и зарубеж производства, которые варим и автоклавируем. Своей коллекции тест-штаммов в лаборатории не имеем.

@roman.s.ovchinnikov 4 жыл бұрын

Здравствуйте. В лаборатории должен проводиться внутренний контроль качества испытаний. На это есть соответствующие документы, которые это регламентируют. По идее лаборатория должна иметь необходимые тест-штаммы. Хотя зависит, какие именно исследования вы проводите, что у вас за лаборатория. Целесообразно проверять ростовые свойства каждой новой партии сред. Ведь среды мы закупаем не так уж часто. Если этого не делать, то результаты наших посевов могут быть недостоверные.

@putkaput9930 3 жыл бұрын

Здравствуйте! Вы сказали, что нужно проверить чашки, с разлитым в них агаром, в течении 5 дней в термостате? Значит вся остальная партия чашек должна где то храниться и ждать результата проверки? И еще такой вопрос, если после разлива агара на крышке чп появляется конденсат в виде капелек воды, как с этим быть?

@roman.s.ovchinnikov 3 жыл бұрын

Здравствуйте. Остальные чашки в это время хранятся в холодильнике. Конденсат - это нормально. После разливки чашки оставьте в боксе на сутки, чтоб подсохли. В холодильнике Храните чашки вверх дном. Перед работой за сутки подержите в боксе при комнатной температуре. Конденсат будет минимальный.

@orifibragimov1295 3 жыл бұрын

скажите пожалуйста какой не буть в среду сабуро добавляются антибиотики

@roman.s.ovchinnikov 3 жыл бұрын

Да, в среду Сабуро добавляют хлорамфеникол для подавления бактерий.

@lusizhukova3598 4 жыл бұрын

Здравствуйте! Подскажите, пожалуйста, какими способами можно закрывать колбы и бутылки для автоклавирования? Вы используете силиконовые пробки, их нужно неплотно надевать?

@roman.s.ovchinnikov 3 жыл бұрын

Добрый день! Как правило я использую ватно-марлевые и прессованные бумажные пробки, они пропускают воздух. Также использую флаконы с завинчивающимися крышками. Туго не завинчиваю. Сверху обвязываю бумагой или фольгой.

@x-ray2511 2 жыл бұрын

Здравствуйте! Спасибо за видео. Поделитесь пожалуйста опытом - как боротся с конденсатной жидкостью на скошеном агаре? Просто отстаивать или после застывания сушить в термостате?

@roman.s.ovchinnikov 2 жыл бұрын

Подержать пробирки при комнатной Т. Если пробка ватно-марлевая - конденсат где-то за ночь высохнет. Можно в термостате, если там влажность не высокая.

@x-ray2511 2 жыл бұрын

@@roman.s.ovchinnikov та вот не сохнет его там образуется где то 1- 1.5 мл

@roman.s.ovchinnikov 2 жыл бұрын

@@x-ray2511 что-то очень много. Какая среда?

@x-ray2511 2 жыл бұрын

@@roman.s.ovchinnikov ГРМ-агар

@oksanaleander3606 2 жыл бұрын

Роман, здравствуйте! Подскажите пожалуйста как работать с готовыми чашками Петри с агаром (уже стеиильными), которые хранятся в холодильнике. За сколько до эксперимента их нужно/можно достать из холодильника? Заранее спасибо

@roman.s.ovchinnikov 2 жыл бұрын

Здравствуйте. Достаньте чашки накануне вечером. За ночь они прогреются, и подсохнут. Могут постоять при комнатной Т 1-2 дня.

@oksanaleander3606 2 жыл бұрын

@@roman.s.ovchinnikov благодарю за ответ

@user-cd3uh9yz8n Жыл бұрын

Скажите а Кондестат на крышках есть? Или если у меня есть ээто страшна как избавится от него снимите видео пожалуйста

@roman.s.ovchinnikov Жыл бұрын

Конденсат - когда разливают горячую средую Дайте есть остыть до 55С, потом разливайте.

@lunna298 3 жыл бұрын

Здравствуйте! Скажите пожалуйста подойдёт любая модель автоклава? И какой лучше использовать автоклав именно для стирилизации сред? Какая у вас модель?

@roman.s.ovchinnikov 3 жыл бұрын

В принципе подойдет любая модель автоклава для лабораторий. У нас автоматический автоклав Sanyo, уже долго, надежный и простой в использовании.

@user-rg8vf3eg5v 3 жыл бұрын

Подойдет любая большая кастрюля под давлением!:)

@zaibusinka Жыл бұрын

@@user-rg8vf3eg5v не видела кастрюль с изюыточным давлением больше 0,7 атм (это щадящий режим)

@user-lx9lb7qr3f 4 жыл бұрын

Здравствуйте! Могли бы Вы показать санитарно-паразитологические исследования (например воды). Выявление гельминтов с помощью концентратора гидробиологического? Спасибо за Ваши видео!

@roman.s.ovchinnikov 4 жыл бұрын

Спасибо за вопрос, но паразитология - не моя специальность. Микробиология не занимается гельминтами.

@user-lx9lb7qr3f 4 жыл бұрын

@@roman.s.ovchinnikov спасибо, будем искать

@user-lx9lb7qr3f 4 жыл бұрын

@@roman.s.ovchinnikov спасибо, будем искать

@user-lx9lb7qr3f 4 жыл бұрын

@@roman.s.ovchinnikov в любом случае, спасибо Вам за канал и качественные видео!

@roman.s.ovchinnikov 4 жыл бұрын

@@user-lx9lb7qr3f Спасибо Вам за отзыв, это приятно)

@roadtotell Жыл бұрын

Добрый день. Не расскажете про технологию плавления агаровых сред?

@roman.s.ovchinnikov Жыл бұрын

Здравствуйте. Плавление уже готовых, но застывших сред, имеете ввиду? Их плавят на водяной бане. Простейший вариант - в кастрюльке с водой на плите. Некоторые плавят в сухожаре, но не доводя до кипения.

@user-io9jy2ot8c 2 жыл бұрын

Поверх ватное марлевых пробок, какую бумагу необходимо использовать, проверяющие требуют крафт бумагу, поэтому вопрос конкретно про бумагу. Заранее спасибо за ответ.

@roman.s.ovchinnikov 2 жыл бұрын

Я считаю для этих целей лучше использовать пергамент, предварительно смоченный. Лучше прилегает, не соскочит.

@user-cr1fr8xq9d 6 ай бұрын

Здравствуйте, подскажите пожалуйста, как работать с СОЖ. Как делать посев на питательные среды? Подложки

@roman.s.ovchinnikov 5 ай бұрын

Слизистая оболочка желудука? Нетипичный материал. В какой форме - на тампоне? Тогда обычный посев штрихом на набор сред.

@user-wn4vv4kv1o 5 ай бұрын

Смазочно-охлаждающая жидкость ( водосмешиваемые эмульсии). на готовые подложки петрифильмы. нет методик. как работать ?

@user-tx3ls5yx6p Жыл бұрын

В большинстве автоклавов нет режима стерилизации 112гр 0.5атм например для сред с углеводами (среда клиглера оболенск сухая), возможно ли использование режима 120гр в любительских целях? Какие модели автоклавов используются в стерилизации сред, как настраиваются режимы, програмно или в ручную.

@roman.s.ovchinnikov Жыл бұрын

Моделей автоклавов большое количество. В некоторых режимы можно настроить вручную, в других уже предустановленные программы. Не советую пользоваться автоклавом на любительском уровне, это серьезное оборудование.

@zaibusinka Жыл бұрын

Можно обговаривать с производителем нужные режимы, но в бактериологии принято что давление и время выставляются независимо друг от друга и в любой комбинации. Не тащите автоклав домой, если вы не прошли обучение по работе на нём и у вас нет под боком мастера, который может регулярно проверять безопасность этого монстра. Любое неосторожное движение и вы калека.

@roman.s.ovchinnikov Жыл бұрын

@@zaibusinka Автоклав домой и вообще домашняя лаборатория - это чревато. Но та же скороварка - это тоже автоклав по сути)

@zaibusinka Жыл бұрын

@@roman.s.ovchinnikov у скороварки всего одно соединение - крышка с кастрюлей и максимальное давление, помнится 0,5 атм (дальше клапан стравливает), а в автоклаве предохранительный клапан на 3 или 3,5 атм выставлен, одних только вентелей как минимум три штуки должно быть - случайно задел или просто какое соединение труб не выдержало - привет ожоговое.

@roman.s.ovchinnikov Жыл бұрын

@@zaibusinka Разумеется, автоклав требует более осторожного обращения, чем скороварка. К счастью в современных автоматических автоклавах всяких вентилей снаружи практически нет.

@user-qv5kx6el1s 4 жыл бұрын

а приготовление жидких сред чем нибудь принципиально отличается?

@roman.s.ovchinnikov 4 жыл бұрын

По сути нет. В жидкие можно добавить агар, и получить плотные.

@Minivan4444 4 жыл бұрын

Сухожарым шкафом может быть духовка(газовой плиты), или микроволновка?

@roman.s.ovchinnikov 4 жыл бұрын

Чтобы расплавить среду? Можете попробовать эти способы на ваше усмотрение. Можно расплавлять на водяной бане.

@Minivan4444 4 жыл бұрын

@@roman.s.ovchinnikov не расплавить а продизенфицировать. Т.е., грубо говоря, литр приготовленной жидкой среды поместить в духовку на какое то время. Теоретически, из-за высокой температуры там погибнут оставшиеся бактерии.

@fandorenko 3 жыл бұрын

@@Minivan4444 даже если в вашей духовке будет 500 градусов, жидкая среда в ней все равно не нагреется выше 100°С, при этом будет активно кипеть, пениться и очень быстро выкипит полностью. А дальше уже начнет прожариваться сухой остаток. Возьмите лучше бытовую скороварку или мультиварку, они набирают нужное давление и жидкость в них нагревается до 120°С без кипения.

@user-xr5kh1zc1k 2 жыл бұрын

@@fandorenko а я столько гадал зачем нужно давление?

@John_Johnson746 Жыл бұрын

@@fandorenko 120 градусов набирается только при давлении 1,08. А в скороварках не более 0,5-0,7 к тому же без манометра и температурного датчика. Но можно ориентироваться на конструкцию. По справочнику теплотехников при давлении 0,5 - температура 112 градусов, при 0,75 - 117 градусов. Получается в диапазоне между 112 и 117 градусов. Конечно не 120, но близко. При температуре выше 105 градусов большинство спор начинают гибнуть, может увеличиться только время стерилизации на 15-20%.

@user-zq2xk1fb8r 4 жыл бұрын

Где и сколько хранится партия среды в чашка Петри, пока проходит тест на стерильность? Какой документ это регламентирует?

@roman.s.ovchinnikov 4 жыл бұрын

Коллега, что касается различных нормативных документов, я думаю Гугл ответит ничуть не хуже, чем я, рекомендую сначала обращаться к нему. Если использование поисковиков по каким-либо причинам невозможно, то воспользуйтесь этой ссылкой - docs.cntd.ru/document/1200067870

@user-zq2xk1fb8r 4 жыл бұрын

@@roman.s.ovchinnikov Спасибо! Нашла этот документ.

@user-zq2xk1fb8r 4 жыл бұрын

@@roman.s.ovchinnikov Ждём новые видео. Интересует микробиологических анализ кормового зерна.

@roman.s.ovchinnikov 4 жыл бұрын

@@user-zq2xk1fb8r Да, интересная тема, особенно анализ зерна на грибы. Но сейчас зерном не занимаемся. Если закажете и оплатите такое исследование - тогда можем и видео снять.

@user-qv5kx6el1s 4 жыл бұрын

ну а скороварка это по сути тот же автоклав, просто маленьких размеров? она же тоже варит под давлением. её можно использовать?

@roman.s.ovchinnikov 4 жыл бұрын

В принципе вы правы. Наверно, можно использовать, но я бы не советовал)

@user-wi7fo6to8n 4 жыл бұрын

Дело в том, что надо точно знать какое давление в скороварке. В автоклаве выставляется определенное давление, исходя от компонентов питательных сред, и которое поддерживается все время стерилизации.

@user-iu7id5ui6e 3 жыл бұрын

Сильно сомневаюсь что моя скороварка делает рис при 2 атмосферах, в кулинарии это впринципе не надо

@fandorenko 3 жыл бұрын

@@user-wi7fo6to8n на каждой скороварке установлен клапан. На нем написано максимальное давление, при котором он начинает сброс. Между температурой и давлением прямая связь. По мере того как растет давление, увеличивается и температура в скороварке. Давлению в 0,7 бар соответствует жар в 115-120 °C. Есть скороварки, рассчитанные на 1 бар.

@zaibusinka Жыл бұрын

Для глюкозо/лактозопептонной среды и прочих нежных сред. Да, можно. Если ваша скороварка может держать необходимый температурный диапазон. Это легко проверить контрольными тестами на температуру и время. А духовка, кстати, это сухожаровый шкаф для стерилизации (при тех же условиях, используйте тест-контроли)

@user-vx6hy6zs2j 3 жыл бұрын

Когда объясняете то некоторые слова не слышны от шума передвижений посуды на столе как называется штатив напишите пожалуйста

@roman.s.ovchinnikov 3 жыл бұрын

Не очень понял, о каком штативе идет речь? Вроде в видео не используется штатив..

@jjdf136 3 жыл бұрын

Подскажите пожалуйста, неужели стерилизация возможна только в автоклаве?

@roman.s.ovchinnikov 3 жыл бұрын

Она возможна также в сухожаровом шкафу. Там обычно стерилизуют не среды, а посуду. А еще СВЧ тоже убивает микробов, но СВЧ-печи используют для стерилизации отработанных культур (специальные лабораторные СВЧ-печи)

@fandorenko 3 жыл бұрын

@@roman.s.ovchinnikov в домашних условиях микробиологи без дипломов используют скороварки и мультиварки. Температура 120-130 градусов - ничем не хуже автоклава. Только объем небольшой, но есть скороварки и достаточно объемные, на 6-8 литров.

@roman.s.ovchinnikov 3 жыл бұрын

@@fandorenko Да, в домашних условиях для стерилизации некоторые используют скороварки, принцип тот же что и автоклав. Этот метод стерилизации описывал в своих книгах P. Stamets, популяризатор грибоводства.

@user-rg8vf3eg5v 3 жыл бұрын

Думаю нет! Кастрюля под давлением из нержаВейки тоже подойдет! "...Я ТАКДУМАЮ...!?

@user-qv5kx6el1s 4 жыл бұрын

а пластиковые чашки петри одноразовые?

@roman.s.ovchinnikov 4 жыл бұрын

Да, конечно. Лабораторный пластик в основном одноразовый.

@user-oe2vd1nz2s 3 ай бұрын

А как приготовить МПА?

@roman.s.ovchinnikov 3 ай бұрын

В МПА главный компонент - это пептон (в виде порошка). Кроме него нужны агар и вода. Это наиболее простая среда.

@user-qv5kx6el1s 4 жыл бұрын

как приготовить кровяной агар? он вообще продаётся в виде порошка?

@roman.s.ovchinnikov 4 жыл бұрын

Продается сухая основа. В нее нужно добавлять специально подоготовленную кровь. Кровь такая продается в определенных лабораториях.

@Koala_plans 4 жыл бұрын

Можно купить дефибринированную кровь барана во флаконах.

@user-qv5kx6el1s 4 жыл бұрын

@@Koala_plans это без фибриногена чтоле?

@roman.s.ovchinnikov 4 жыл бұрын

@@Koala_plans Можно, но мало где. Вы например где покупаете?

@maychybyr3801 4 жыл бұрын

@@roman.s.ovchinnikov можно самому сделать если есть виварий с баранами. Интересно, а человеческая кровь подойдет?

@user-hq9og9zs8s 6 ай бұрын

А где контроль pH после стерилизации??И когда объем сред очень большой и вовремя нужно произвести посев!

@roman.s.ovchinnikov 6 ай бұрын

Да, рН среды надо контролировать до и после и стерилизации. Насчет объема не понял вопроса

@kamilabadalova8672 3 жыл бұрын

А про индикатор для контроля стерилизации не сказали ни слова

@roman.s.ovchinnikov 3 жыл бұрын

Спасибо за ремарку, это важный момент. Действительно, упустил из вида, надо будет отметить это в следующих видео.

@loveamputee 3 жыл бұрын

ПЕПТОН - ИЗ ЧЕГО ОН ДЕЛАЕТСЯ ИЛИ ИЗ КОГО ???

@roman.s.ovchinnikov 3 жыл бұрын

Пептон делается из мяса, обработанного ферментами. Или другими гидролизующими агентами.

@user-ed1sp7be6j 2 жыл бұрын

Это какая питательная среда, названия скажите

@roman.s.ovchinnikov 2 жыл бұрын

Это среда Сабуро. Посмотрите 1ю часть видео.

@user-ed1sp7be6j 2 жыл бұрын

@@roman.s.ovchinnikov спасибо

@AlexanderTripolski 2 жыл бұрын

Спасибо за фильм! Пару замечаний.Музыка,как фон это лишнее.Длинное вступление

@roman.s.ovchinnikov 2 жыл бұрын

Спасибо за комментарий)

@muxriddinsultonov2987 3 жыл бұрын

Все видео хорошее но проблемы с микрофоном вас очень плохо слышно.

@user-rs5iy9lf6q 2 жыл бұрын

А термоиндикпторы не положил

@roman.s.ovchinnikov 2 жыл бұрын

Индикаторы контроля стерилизации?

@user-rg8vf3eg5v 3 жыл бұрын

Роман! Каждая домохазяйка у которой есть герметическая кастрюля можетработать с автоклавам! Не нужно важничать черезчур!

@roman.s.ovchinnikov 3 жыл бұрын

Может? Пусть работает, раз вы так считаете. Но я бы в такой лаборатории анализы не делал. А вы как знаете.

@zaibusinka Жыл бұрын

По-вашему любой водитель легковушки легко может водить грузовые авто без дополнительного обучения? Гибдд важничает, значит?

@Non-conventional 4 жыл бұрын

Добрый день! Если мой бульон Сабуро выпал в осадок и помутнел после пастеризации(60-80С 8-12часов), я его перегрел или передержал? (Бульон в пластиковых флаконах, по этому не могу стерилизовать в автоклаве)

@roman.s.ovchinnikov 4 жыл бұрын

Добрый день. Не сталкивался с подобным явлением, хотя я никогда не пастеризовал среды. Их надо готовить в соответствии с инструкцией. Сама среда из готового порошка? или из чего?

@Non-conventional 4 жыл бұрын

Микробиология и инфекции. Канал Романа Овчинникова да, среда из купленного порошка.

@zaibusinka Жыл бұрын

От перегрева среды обычно темнеют. В вашем, скорее всего, просто зародилась новая жизнь ) (помутнение питательных сред это признак роста микроорганизмов)